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Modification d'hépatocytes.



  1. #1
    BBarbaraaa

    Lightbulb Modification d'hépatocytes.

    Bonjour,

    Mon prof d'endocrinologie nous à demandé d'élaborer un protocole qui permettrait de répondre à une question que l'on se pose sur le diabète de type 1 (et ce doit être quelque chose de complètement innovant). J'ai choisi la modification cellulaire et la greffe de ces cellules.
    Concrètement mon prof m'a dit que c'était une bonne idée (franchement pour ma part j'en doute!).
    Donc mon idée était de créer un vecteur IRES contenant le gène de l'insuline, une gène protéase thiol (pour cliver la pré-insuline en insuline). Mon problème est que je ne sais pas quel promoteur choisir! En effet si je choisi un promoteur fort type CMV ou SV40 comment vais-je pouvoir contrôler la quantité d'insuline produite? L'idéal serait de trouver un opéron ou un promoteur glucose dépendant mais je ne sais pas du tout si ça existe...
    Bref, malgré toutes mes recherche et tous les articles que j'ai pu lire je n'ai rien trouvé à ce sujet...

    Si quelqu'un a une idée même vague je suis preneuse!

    -----


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  3. #2
    Flyingbike

    Re : Modification d'hépatocytes.

    les constructions qui répondent au glucose existent (par exemple le ChoRE du promoteur de la L-PK ou le promoteur de n'importe quel gène qui répond au glucose dans l'hépatocyte, comme l'ACC, FAS, etc.).

    J'imagine que le but est de "fabriquer" des pseudo cellules beta ? Il faut comprendre que la difficulté ce n'est pas de faire synthétiser l'insuline en présence de glucose, c'est de faire SECRETER l'insuline, et là c'est tout à fait autre chose. De plus, il faut également avoir une réponse insuline dans une gamme de glycémie physiologique ce qui est encore une difficulté en plus.

  4. #3
    BBarbaraaa

    Re : Modification d'hépatocytes.

    Merci beaucoup pour cette réponse!

    Je n'avais pas pensé a la sécrétion d'insuline en effet! Je ne sais pas exactement comment ce fait cette sécrétion, j'imaginais qu'il s'agissait d'une "simple" exocytose.
    Je vais réfléchir à ce problème.
    Je ne suis absolument pas une spécialiste de ce domaine...

  5. #4
    Flyingbike

    Re : Modification d'hépatocytes.

    non, la sécrétion d'insuline a lieu en quelques minutes en présence de glucose, vous comprendrez qu'il ne s'agit pas la d'un mécanisme de régulation de l'expression des gènes, mais d'une machinerie d'exocytose glucose-dépendante assez complexe.

    En revanche, la création de cellules sécrétant constitutivement de l'insuline n'est pas inutile, surtout dans le cas du diabète de type 1 où une injection basale d'insuline (a action lente) à laquelle on superpose des "pulse" au moment des repas constitue le traitement typique.

  6. #5
    BBarbaraaa

    Re : Modification d'hépatocytes.

    Je ne sais pas si le choix de mon sujet est réellement approprié.
    A travers ce travail je souhaitais proposer une alternative aux greffes de cellules B qui se font actuellement. La lignée cellulaire optimale pour remplacer ces cellules B me semblait être les hépatocytes (de part leur abondance, leur localisation près du système porte,...). Mais concrètement je n'ai absolument AUCUNE idée quant à la justesse de mes hypothèses. Sachant que - de toutes manières- une cellules ayant subit de nombreuses modification deviennent imprévisibles, je ne pense même pas qu'on prendrait le risque de les greffer.

  7. A voir en vidéo sur Futura
  8. #6
    Flyingbike

    Re : Modification d'hépatocytes.

    dans ce pdf du chu de nantes, il y a tout sur les tentatives de bricolage de cellules insulinosécrétrices : http://irb.chu-montpellier.fr/fr/PDF...et_diabete.pdf

    bonne lecture

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  10. #7
    BBarbaraaa

    Re : Modification d'hépatocytes.

    Merci beaucoup!

  11. #8
    LXR

    Re : Modification d'hépatocytes.

    Citation Envoyé par Flyingbike Voir le message
    dans ce pdf du chu de nantes, il y a tout sur les tentatives de bricolage de cellules insulinosécrétrices : http://irb.chu-montpellier.fr/fr/PDF...et_diabete.pdf

    bonne lecture
    Il est du CHU de Nantes mais l'adresse est à Montpellier...
    Never give up.

  12. #9
    Flyingbike

    Re : Modification d'hépatocytes.

    chu de montpellier bien sur, c'est parce que j'etais en contact avec un diabéto du chu de nantes au même moment

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