Séquençage d'un gène

[Evae]

Bonjour,

Je m'interroge sur le séquençage de l'ADN et je ne trouve aucun livre, ni site me permettant d'obtenir une réponse.

En effet, j'ai cru comprendre que le séquençage de l'ADN se fait grâce à la méthode de Sanger.

Sur le lien ci contre on peut voir qu'il faut des amorces connues pour trouver la séquence d'un gène inconnu. http://www.snv.jussieu.fr/vie/dossie...e/sequence.htm
Or, si on veut trouver la séquence d'un gène se trouvant dans un génome non séquencé, comment peut on connaître la séquence des amorces utiles ?
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[Taz_79]

Salut,

En fait ta réponse est un peu dans ta question ^^. On connaît la séquence des amorces car c'est le chercheur lui-même qui créer ses amorces qu'il va par la suite fixer à la séquence inconnue du gène.

Bonne soirée.

[Evae]

Oui mais comment il sait que cette sequence va bien s'hybrider au bon endroit si le génome où se trouve le gène n'a jamais été séquencé?
Je peux aussi poser ma question autrement: comment on fait les personnes qui ont séquencé le premier génome, et donc qui ne connaissaient aucune séquence sur ce dernier ?

[Flyingbike]

on peut faire du primer walking à partir d'une séquence connue.

Sinon il y a aussi le séquençage avec amorces aléatoires comme dans le shotgun

On peut également utiliser des adaptateurs qui consistent à ajouter une séquence connue à l'extrémité d'une séquence inconnue.

(non exhaustif)

[A voir en vidéo sur Futura]