Sec-hplc
Bonjour,
Je demande de l'aide car j'ai un petit soucis avec une SEC-HPLC.
Ma réference (anticorps monoclonal) présente une nouvelle forme de HMW que je ne retrouve pas lors de mes premières analyses.
J'ai perdu juqu'à environ 10% en pureté entre le début et la fin de la séquence.
Cette 2e forme de HMW a augmenté et lors du changement de colonne elle était présente mais < 1% et après ça se mets à augmenter et alors à ne pas apparaître du tout..
Biensûr vous allez me dire qu'il y a dégradation de l'échantillon mais non car utilisation de plusieures références fraîchement préparés ou congelés elles ne sont pas affectées de la même façon et des changement de lot de colonne.(3 fois)
La n.°1 a tenu jusqu'à 3-4 mois
La n.° 2 ne remplissait pas les critères de SST après la 1re analyse
La n.°3 Tiens le coups après 2 séquences
3 colonnes étant testés cette forme n'apparait pas toujours. Et elle n'apparait pas sur les échantillons! (pas de contamination).
On a vérifié la température du fous HPLC, l'équipement en lui même, on a injecté la phase mobile , rien..
Aidez moiiiiiii
Mercii
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