Bonjour.
J'ai beaucoup de mal avec les calculs d'activité enzymatique, d'activité totale...
Je dois déterminer la concentration d'une enzyme en présence de détergents à différentes concentrations.
Dans un tube j'ai ajouté :
- 100 µl d'homogénat contenant l'enzyme
- 150 µl de détergent 100mM
- 250 µl de tampon Phosphate
Dois-je tenir compte d'une dilution à cette étape ?
Après centrifugation, je dois prélever 200 µl du surnageant précédent auquel j'ajoute :
- 2,6 mL de tampon P
- 100 µL d'une solution servant pour le dosage colorimétrique
- 100 µL de substrat qui va déclencher la réaction
Comme précédemment, une dilution est à tenir compte ?
Au final, je réalise une cinétique sur 10 min et je trouve, par exemple pour un detergent X à 100mM au départ
DO/10min = 0,261
On me donne le Epsilon E=0,136.10^8 cm²/mol
Merci de votre aide !
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