Agitation, repiquage

[roro91]

Bonjour,

On voit souvent sur les protocoles utilisant des bactéries E. Coli d'incuber les cultures sous agitation... Les bactéries se développent t'elles mieux sous agitation? Comment expliquer cela?

Aussi, lorsque l'on veut détecter des bactéries ayant été transformées (ayant capturé un plasmide contenant un gène de résistance à l'ampicilline) sur un milieu sélectif contenant donc de l'ampicilline et qu'on repique ensuite les colonies qui se sont développées, il vaut mieux repiquer des colonies de taille intermédiaire et pas des colonies trop volumineuses. Pourquoi? Un lien avec les mutations?

Merci d'avance
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[Saswordz]

Bonjour,

La culture d'E. Coli sous agitation permet aux bactéries de ne pas adhérer au support, ce qui empêcherait une culture correcte de la bactérie.

Pour ce qui est du choix des colonies poussant sur milieu sélectif en général il faut essayer de prendre et les grosses colonies, et les petites, ça évite un biais dans les résultats.

[noir_ecaille]

Les bactéries modifient leur métabolisme lorsqu'elles prennent la forme d'un biofilm. Aussi l'expression du plasmide peut s'en trouver modifier.

On cultive donc sous agitation pour garder les bactéries sous forme planctonique