bonjour:
L'isolement de protéines contenant des canaux aqueux (les aquaporines) a été difficile ,Pourquoi cela a-t-il rendu difficile l'isolement des aquaporines ?
existe-il un moyen de distinguer la diffusion de l'eau à travers la membrane plasmique de son passage par les aquaporines?
Les aquaporines sont des protéines membranaires donc la difficulté de n'importe quelle expérience les impliquant est multipliée par 10 !
Pour faire la différence entre une diffusion par les aquaporines ou à travers les membranes tu peux reconstituer l'aquaporine dans des liposomes remplis d'eau tritiée, mesurer la vitesse à laquelle le tritium passe à l'extérieur et comparer à des liposomes sans aquaporine.
merci pour la réponse, pouvez vous encore m'expliquer la réponse de la première question? SVP
par example la difficulté à l'isolé par rapport a la proteine de K+ KcsA
certain disent que c'est à a cause de la diffusion rapide de l'eau à travers de ces protéine, mais je n'arrive pas encore à comprendre pourquoi !
Déjà ce sont des protéines membranaires, donc liposolubles, ce qui peut ajouter à la difficulté.
Ensuite ce sont des protéines relativement petites si je ne m'abuse (environ la moitié de la taille de la sérum-albumine humaine). Or la différence entre peptide et protéine repose justement sur la taille, la sérum-albumine ayant un temps été considérée comme la plus petite protéine -- depuis au moins 2009, on a posé la limite à cent acides aminés (~10kDa).
Après d'autres difficultés ont pu provenir lors de la purification.
