Bonjour,
Grâce à une expérience, j'ai pu déterminer qu'une mutation affectait l'expression d'un gène codant pour une protéine de transport.
J'aimerais savoir comment je pourrais déterminer à quel niveau de la voie de signalisation cette mutation agit. Quelles techniques pourrais je proposer?
Merci d'avance.
Quelqu'un a t'il une réponse?
J'avoue que là a première vue il n'y a pas assez d'information!
La mutation que tu as trouvé est sur la séquence de ta protéine de transport ou sur une région régulatrice?
Bonjour,
En fait je ne sais justement pas... Je sais que la mutation agit quelque part pour qu'au final, l'expression du gène codant pour la perméase (AGP1 de la levure) ne soit pas enclenchée...
Il faudrait envisager des croisements pour essayer de cerner l'endroit où elle agit?
Ah donc ce n'est pas toi qui a induit la mutation... Ok je comprend mieux lol
Je ne suis pas vraiment expert en levure alors je ne peux pas vraiment t'aider. Je travaille sur un parasite et je ne vais pas dire que dans ce cas on séquence tout de suite mais c'est pas loin lol
Désolé pour mon manque d'aide dans ce cas
^^ Merci quand même.
Tout ce que je vois c'est de faire des croisements avec d'autres mutants. Quelqu'un d'autre aurait une idée?
a mon avis avec les technologies actuelles, le meilleur compromis temps/argent est le séquencage total, avec confirmation par mutagénèse dirigée.
Il s'agit de S. cerevisiae, donc son génome a déjà été entièrement séquencé. Il faudrait donc analyser tout le génome du mutant en comparaison au génome normal pour détecter l'endroit de la mutation!?
Merci
