Bonjour à tous,
J'ai un petit problème et j'aimerais savoir si quelqu'un a déjà rencontré ce problème et/ou a une solution.
Il y a quelques temps j'ai travaillé avec des HEK transfecté de façon stable avec mon canal ionique d'intérêt (vecteur pcDNA3, selection G418).
Niveau expression et localisation de la proteine pas de problème (verif faite en imagerie et biotinylation de surface).
Le problème vient de la fonctionnalité de mon canal: après 2 semaines de culture je me retrouve avec des courants super variables... certaines fois le courant est "normal" alors que d'autres fois je n'enregistre rien ou alors un courant énorme...
Je ne pense pas que ceci proviennent de clones multiples car si j'isole quelques clones et verifie l'expression celle ci ne change pas. J'ai essayé de diminuer l'AB et ça ne change rien!
Quelqu'un a déjà rencontré ce problème de variabilité fonctionnelle avec des Hek transfectée stablement?
Merci d'avance pour vos réponse.
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