Bjr,
je suis entrain de faire une AS-PCR mais je rencontre un problème de smear qui apparait dans toutes les réactions. J'ai diminué la concentration de mes ADN mais ça persiste tjr. Voici mon programme:

15 min à 95 C,


10 cycles:

20 s à 94 C,

25 s à 68–55 C touchdown (1.4 C/cycle),

30 s à 72 C

36 cycles:

20 s à 94 C,

25 s à 55 C,

35 s à 72 C.



10 min à 72 C

Auriez vous des solutions à me proposer. Merci