PCR classique - PCR en temps réel !

[invite058f39b6]

Bonjour les scientifiques !

J'ai un tout petit problème (que j’appelle confusion peu bête et naïve ) c'est à propos de la PCR : la Polymerase Chaine Reaction.
La prof quand elle nous a enseigné la PCR en temps réel , la pauvre elle a cru qu'on nous a déjà parler ( les années précédentes ) de quelque chose appelée PCR et elle a commencé a parler le chinois ( je sais que ça arrive des fois ces sensations ) ! Alors j'ai cherché sur internet sur cette fameuse chaîne, j'ai compris beaaaaucoup de trucs ( siiincérement ) mais j'ai un tout petit problème : est ce que cette PCR en temps réel vient de la PCR classique ou bien plus clairement :
Est ce que le principe de la PCR en temps réel est le même que celui de la PCR classique, et la seule différence est au niveau de l'analyse des produits amplifiés ( les amorces de l'ADN) ? ou il y'a une autre différence? ou que j'ai rien compris du tout et que j'avais l'impression !

Merci beaucoup de bien vouloir me répondre ! ( c'est ma première question : j'espère d'avoir respecter les conditions ) !

à ++ !
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[invite2db69bfb]

Bonsoir.

Si je reprends de manière synthétique :

La PCR, polymerase chain reaction, est un ensemble de réaction visant à amplifier un fragment d'ADN recherché. Pour faire court, on prend des amorces (Brins d'ARN) qui iront s'hybrider au début et à la fin du fragment que l'on veut amplifier. Grâce à une polymérase (Taq.), l'ajout de nucléotides, tampon (pour les bonnes conditions de fonctionnement de l'enzyme) le fragment voulu sera répliqué en des milliers d'exemplaires.
(Ce sont les fameuses trois phases : Dénaturation de l'ADN / Hybridation des amorces / Elongation.)

Maintenant, un dérivé de cette technique permet de suivre en temps réel (tu peux voir ce qu'il se passe sur un écran) cette PCR. Mais c'est exactement la même chose qu'il se passe ! C'est la PCR en temps réel. On va juste rajouter des marqueurs fluorescents qui seront détectés à chaque fin de l'élongation par la machine réalisant cette PCR. Du coup, à l'écran tu pourra voir l'évolution en temps réel de ton amplification.

Je ne sais pas si j'ai été clair... Mais pour résumer, une PCR en temps réel permet de faire EXACTEMENT la même chose que la PCR, sauf qu'en plus tu peux voir l'évolution de ton amplification sur un écran d'ordinateur.


EDIT : A quoi ça sert...?! A avoir une quantification absolue l'ADN de départ, qui est amplifié.

[invite2ac96057]

ça te permet aussi d'identifier différentes espèces d'un même genre si tu sélectionnes bien te amorces tu peux voir une différence de Tm et donc de séquence.

[invite058f39b6]

Htu : t'étais SUPER CLAIR ! Merci beaucouuuuuupp !
franckeeuuhh merci beaucoup pour l'information !! mais nous , on nous a pas entré dans les details : Tm et ...
Merci beacuoup les gars vous êtes génials !

[A voir en vidéo sur Futura]