Bonjour tout le monde,
J'aimerai savoir si l'un de vous avez déjà tenté de faire un clonage en utilisant un in-fusion cloning kit sans linéariser le vecteur cible?
Je m'explique j'ai un épisome naturel que j'ai isolé de mes cellules, j'aimerai le modifier en insérant un plasmid que j'ai confectionné.
La petite quantité de mon épisome que j'ai pu extraire m'a fait opter pour le in-fusion cloning.
j'ai la séquence de mon épisome mais je n'arrive pas à le couper avec des enzymes de restriction qui sont sensées le couper. C'est pour cela que j'aimerai savoir si il en linéarisant ma construction et en utilisant la recombinase il y a des chances que j'obtienne la fusion des deux?.
merci d'avance,
best,
Franck
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