Bonjour, bonjour !
Je ne comprends pas le rôle de la topoisomérase dans le kit de " TA cloning " qui permet de créer des extrémités cohésives sur un vecteur de clonage..( ajoute un T aux extrémités du vecteur, et un A aux extrémités du produit PCR à inserer dans le vecteur ).
J'espère avoir été claire..
Bonne soirée...et merci de votre réponse!
Bonjour,
Afin d'éviter tout malentendu, pourrais-tu vérifier le nom de l'enzyme (c'est pas plutôt Taq polymerase ?) ainsi que préciser la référence/fabriquant du Kit ?
Merci
Non, non justement ! je suis bien sûre que c'est la Topoisomérase
c'est le kit " TOPO TA cloning " de Invitrogen...
Ha Ok.
La topoisomérase n'est pas utilisé ici pour son activité cellulaire mais pour rendre le vecteur plus réactif, dans le sens de plus à même d'incorporer un insert.
La topoisomérase est liée de façon covalente au vecteur, ce qui le rend plus réactif. L'activité catalytique de cette enzyme n'est pas exploitée, seulement sa capacité à se lier aux nucléotidesEnvoyé par jmbowie
aaah ! elle permet donc " d'attraper " l'insert afin qu'il se lie plus facilement au vecteur?
Merci beaucoup pour la réponse !!
