[Biochimie] Topoisomérase et kit " TA cloning" ...
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Topoisomérase et kit " TA cloning" ...



  1. #1
    GénomHic

    Topoisomérase et kit " TA cloning" ...


    ------

    Bonjour, bonjour !

    Je ne comprends pas le rôle de la topoisomérase dans le kit de " TA cloning " qui permet de créer des extrémités cohésives sur un vecteur de clonage..( ajoute un T aux extrémités du vecteur, et un A aux extrémités du produit PCR à inserer dans le vecteur ).

    J'espère avoir été claire..

    Bonne soirée...et merci de votre réponse!

    -----

  2. #2
    jmbowie

    Re : Topoisomérase et kit " TA cloning" ...

    Bonjour,

    Afin d'éviter tout malentendu, pourrais-tu vérifier le nom de l'enzyme (c'est pas plutôt Taq polymerase ?) ainsi que préciser la référence/fabriquant du Kit ?
    Merci
    Blast up your life!

  3. #3
    GénomHic

    Re : Topoisomérase et kit " TA cloning" ...

    Non, non justement ! je suis bien sûre que c'est la Topoisomérase

    c'est le kit " TOPO TA cloning " de Invitrogen...

  4. #4
    jmbowie

    Re : Topoisomérase et kit " TA cloning" ...

    Ha Ok.

    La topoisomérase n'est pas utilisé ici pour son activité cellulaire mais pour rendre le vecteur plus réactif, dans le sens de plus à même d'incorporer un insert.
    Blast up your life!

  5. A voir en vidéo sur Futura
  6. #5
    jmbowie

    Re : Topoisomérase et kit " TA cloning" ...

    Citation Envoyé par jmbowie Voir le message
    Ha Ok.

    La topoisomérase n'est pas utilisé ici pour son activité cellulaire mais pour rendre le vecteur plus réactif, dans le sens de plus à même d'incorporer un insert.
    La topoisomérase est liée de façon covalente au vecteur, ce qui le rend plus réactif. L'activité catalytique de cette enzyme n'est pas exploitée, seulement sa capacité à se lier aux nucléotides
    Blast up your life!

  7. #6
    GénomHic

    Re : Topoisomérase et kit " TA cloning" ...

    aaah ! elle permet donc " d'attraper " l'insert afin qu'il se lie plus facilement au vecteur?

    Merci beaucoup pour la réponse !!

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