Quelle est cette unité ?

[inviteac886d6e]

bonjour,
dans un TP, je dois calculer le volume des composants d'un méléange pour faire la PCR. On me dit que j'ai une taq poly a 1,25 U, je sais pas ce que c'est que ''U'' et on dit aussi que la taq est à 0,5 U/microL.
sachant que mon volume final est de 25 microL, Par calcul, on doit trouver 2,5 microL de volume initiale; ce que je n'arrive pas a retrouver
j'utilise la formule Ci x Vi = Cf x Vf
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[invite93bc74bf]

bonsoir !
alors l'unité U correspond à des micro moles par minutes : µmol / min
je l'ai vue dans le contexte d'un dosage enzymatique, mais je pense qu'elle s'applique surement également pour une PCR
mais d'après mon calcul, tu devrais plutôt avoir V = 1.25 / 0.5 = 2.5 µL
bref, je sais pas trop ou y'a un souci, mais j'espère t'avoir quand même été utile =)

[invitee4e79868]

Bonjour,
je suis d'accord avec la_chataigne, même si la définition est plus large :

L'unité d'activité enzymatique (U) est définie en terme de quantité de substrat disparaissant par unité de temps ou de quantité de produit apparaissant par unité de temps.

Mais dans la pratique, l'unité la plus utilisé est µmol/min ou mmol/min.
Une autre unité similaire est le katal, mais elle n'est que peu utilisé même si c'est la référence pour le système international (mol/sec).
Bref, en gros, c'est la vitesse à laquelle travaille ton enzyme (restriction, polymérase, protéase...) car ce qui est compté est le substrat consommé ou le produit apparut.

[inviteac886d6e]

ah d accord merci, moi je faisais 1.25*25(le vol final)/0.5

[A voir en vidéo sur Futura]

[Flyingbike]

d'accord avec la définition générale.
Cependant pour les enzymes complexes de ce type, comme pour d'autres (DNase, endonculéases, et même trypsine, collagénase, etc.) la définition de l'unité est beaucoup plus spécifique et n'a plus grand chose à voir avec l'unité enzymatique de base, VOIRE dépend des fabricants. Par exemple chez un fournisseur (cette définition semble assez consensuelle) :

One unit is defined as the amount of enzyme that will incorporate 10 nmol of dNTP into acid insoluble material in 30 minutes at 74°C.

Bonne soirée