[Immunologie] Immunoprecpitation: liaison de la resine protG avec l'anticorps qui marche pas
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Immunoprecpitation: liaison de la resine protG avec l'anticorps qui marche pas



  1. #1
    invite1d2faae6

    Immunoprecpitation: liaison de la resine protG avec l'anticorps qui marche pas


    ------

    Bonjour tous le monde. Je suis entrain de faire la mise au point d'une IP. pour se faire j'ai voulu juste tester le rendement de la résine protG avec l’anticorps sans rajouter la protéine d’intérêt. la résine ne capte même pas le 1/10 de la quantité de l'anticorps de départ qui est de 1µg dans 500µl de PBS avec 50µl de la résine.
    Je laisse la résine en contacte avec l’anticorps toute la nuit puis après je lave 3 fois avec du PBS et j'élue finalement dans 50µl de glycine 2.5!!!
    Est ce que vous avez des suggestions pour améliorer le rendement?
    Merci!

    -----

  2. #2
    noir_ecaille

    Re : Immunoprecpitation: liaison de la resine protG avec l'anticorps qui marche pas

    C'est peut-être à cause des charges ? Avez-vous essayé de laver au tampon Tris-EDTA ou phosphate sans NaCl ? Quelle résine utilisez-vous ?

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