Bonjour, je fais un tpe sur l'identification génétique avec une de mes parties qui est la pcr, et je bloque sur un inconvénient de la PCR qui est
"La technique présente cependant un inconvénient, puisqu'elle amplifie non seulement l'ADN étudié, mais aussi un ADN étranger qui viendrait le contaminer, faussant alors toute l'analyse. "
Quel est cet ADN étranger et d'où vient-il, svp.
merci.
Salut,
Lors d'une PCR, la source de l'ADN contaminant est souvent inconnue ...
Le plus courant, c'est de contaminer une solution stock avec un ADN sur lequel on a déjà travaillé.
Ca peut aussi être de travailler comme un cochon (sans gants, tousser au dessus de ses tubes, faire une PCR sur une paillasse où il y a des bactéries / champignons qui poussent sur des boîtes juste à côté et qui peuvent se propager ...).
Dans tous les cas, on ne sait pas d'où elle vient, et s'il y a contamination, l'expérience n'est pas interprétable et il faut recommencer.
C'est pour ça qu'il est nécessaire de faire contrôle négatif (= mettre tous les réactifs, sauf l'ADN) pour s'assurer qu'il n'y a pas eu de contamination.
Les contaminations arrivent vite, car une très petite quantité va être amplifiée en même temps que le fragment d'ADN d'intérêt.
Pour éviter ça en labo, on utilise des pipettes différentes pour pipeter les ADN (qu'on ajoute en dernier dans le mix de PCR) et les solutions stock. On utilise également des cônes avec filtre.
Il y a aussi la "contamination" des amorces, ou "bruit de fond"
D'accord, merci beaucoup
