bonjour à tous,
dans mon labo j'aimerai utilisé de la BFA afin d'étudier le turn over d'un récepteur. Savez-vous combien de temps je dois l'incuber avec mes cellules et dans quelles conditions avant de pouvoir stimuler mes cellules (anti TCR), les fixer et de les marquer pour le FACS ???
merci beaucoup de vos réponses,
moi je rajoute la PMA/iono pour stimuler les cellules en même temps que la BFA. Le tous pendant 4h à 37°C avant le lavage, fixation et permeabilization.
ok merci de ta réponse. En fait je n'uiliserai pas la PMA/iono car j'aimerai étudier si l'endocytose de mon récepteur est TCR dépendant ... donc j'aurai aimé traité mes cellules 15min à la BFA à 37°C, stimuler TCR à différents temps, fixer, marquer et passer en cyto ... mais apparemment 15min de BFA ça ne suffirait pas ?? désolé j'ai jamais utilisé cette drogue et dans les mat et meth des diffèrents papiers c'est assez confus ... merci de votre aide !
