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Criblage



  1. #1
    Oib

    Criblage


    ------

    Bonjour,

    Dans la synthèse de l'insuline in vitro par exemple, on effectue un criblage des "colonies blanches" obtenues après ensemencement sur un milieu contenant le lactose. On rechercher les bactéries ayant un plasmide contenant le gène recherché mais le fait que ces colonies soient blanches, cela veut dire pas d'expression du gène de la beta-galactosidase et donc insertion du gène d’intérêt non?

    -----

  2. #2
    Guillaume69

    Re : Criblage

    Bonjour,

    Je suppose que tu parles des plasmides de type pbluescript.

    C'est bien ça.

    Si une colonie pousse, c'est qu'elle a bien reçu un plasmide : cet événement est séléctionné par un gène de résistance à un antibiotique présent dans le milieu.
    Si une colonie est blanche, c'est qu'il y a un insert qui a disrupté la séquence de la beta-galacosidase.

  3. #3
    Guillaume69

    Re : Criblage

    Au fait, je parlerais plutôt de "sélection" plutôt que criblage. Criblage ça implique une recherche d'une nouvelle molécule (séquence d'ADN, ADNc, protéines, ...).

    Là viciblement, il s'agit de synthétiser quelquechose de précis.

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