Test Elisa

[invitef1fd307b]

Bonjour,
hier j'ai fait un test Elisa sandwich afin de determiner la concentration et l'isotype de l'Ig présent dans un surnageant d'hybridome de souris.
Pour ce faire on a coaté la plaque avec des anticorps polyclonaux de chèvre, on a lavé puis on a mis notre solution d'Ac de souris de concentration x, on a de nouveau lavé puis enfin on a mis des Ac anti-Ig de souris couplés à la peroxydase.
Est ce que c'est normal qu'on est pas utilisé d'antigène?
Est ce la partie variable de l'anticorps qui reconnait la partie constante de l'autre anticorps?

Si je me suis mal exprimée n'hesitez pas à me demander des explications ^^
Merci d'avance pour votre aide =)
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[invite513ac0a6]

Oui dans ce cas là, la protéine que tu détectes, donc qui fait office d'antigène, ce sont les Ac de souris présents dans le surnageant de tes hybridomes.

Parfois le vocabulaire peut prêter à confusion, mais retiens juste que dans le fonds, un anticorps c'est une protéine comme une autre, pouvant être reconnue par d'autres anticorps.

[invitef1fd307b]

Merci beaucoup pour cette explication =).
Peux-tu répondre à mon autre question, si tu as la réponse évidemment ^^

[invite513ac0a6]

Oui pour l'autre question tu as raison, l'anticorps de détection utilise son site de reconnaissance de l'antigène, qui est quoiqu'il arrive dans la partie variable, pour reconnaitre le déterminant antigénique correspondant qui lui va être situé dans la partie constante de l'autre anticorps.

[A voir en vidéo sur Futura]