Bonjour,
Nous avons réalisé un Western Blot (membrane PVDF) et en parallèle sur un autre gel une coloration au bleu de Coomassie, en déposant les mêmes solutions.
Lorsque j'observe mon gel coloré au bleu de C. je vois bien de nombreuses bandes. Nous avons déposé deux conditions différentes. Et dans l'une d'elle j'observe une bande aux environs de 15kDa (ce qui correspond au poids de la protéine qui nous intéresse) qui n'est pas présente dans l'autre condition.
Jusque là pas de souci, en revanche, après transfert et révélation (Ac primaire et secondaire contre ma protéine). La bande s'observe cette fois aux environ de 10-11 kDa.
Evidement, la bande observée au Coomassie peut ne pas correspondre à ma protéine, j'en suis conscient.
Cependant, je l'observe sur membrane à une masse moléculaire plus faible que celle que j'attends.
Ma question est donc: Comment se fait-il qu'il y ait une si grande différence ? Le transfert peut il affecter la masse moléculaire des protéines ?
Je vous remercie,
moleculR
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