[Biologie Cellulaire] Création d'anticorps polyclonaux et monoclonaux
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Création d'anticorps polyclonaux et monoclonaux



  1. #1
    invite60c63144

    Création d'anticorps polyclonaux et monoclonaux


    ------

    Bonjour,

    J'aimerais savoir quelles sont les GRANDES étapes pour produire des anticorps au laboratoire ?

    Je ne veux pas les détails s'il vous plaît, juste les grandes étapes.

    Et j'aimerais aussi savoir s'il vous plaît si la production d'anticorps au laboratoire est automatisée ou pas ? Si oui, à quelle étape ?

    J'espère avoir été clair MErci

    -----

  2. #2
    invitec1c0d3c0

    Re : Création d'anticorps polyclonaux et monoclonaux

    Bonjour,

    On injecte les antigènes (ou les protéines fusionnées a des éléments reconnus par le système immunitaire) a reconnaître à un animal (bien souvent un lapin), on attend qu'il produise des Ac conte cet antigène, on récupère les lymphocytes B de l'animal, on les met en culture pour qu'ils se multiplient et augmentent ainsi la quantité d'Ac, puis on lyse ces cellules et on purifie les Ac par HPLC.

    Voilà, c'est du rapide rapide, si tu veux des protocoles complets, je peux détailler

  3. #3
    invite60c63144

    Re : Création d'anticorps polyclonaux et monoclonaux

    Ah ok merci je vois mieux. Non je veux pas trop de précision car de toute façon je ne comprendrais pas tout

    Juste un truc, c'est quoi HPLC ?

  4. #4
    invitec1c0d3c0

    Re : Création d'anticorps polyclonaux et monoclonaux

    C'est une des variantes de chromatographie : High Performance Liquid Chromatography, et ces techniques permettent de séparer les différents composant d'un mélange en fonction de leur affinité pour une phase solide (une plaque) sous l'effet d'une phase mobile (mélange de différents solvants) ...

    Tu peux te renseigner sur la technique (il y a des sites qui l'expliquent bien mieux que moi), mais la finalité sera la séparation des composants d'un mélange, donc ici, de séparer nos anticorps spécifiques de toutes les autres protéines contenues dans le lysat cellulaire.

  5. A voir en vidéo sur Futura
  6. #5
    invite60c63144

    Re : Création d'anticorps polyclonaux et monoclonaux

    Ok merci beaucoup !

    Donc pour la purifier, on met la solution d'anticorps dans cette machine (voir photo) et hop ?!

    Ca ressemble à ça enfaite : http://en.wikipedia.org/wiki/File:Agilent1200HPLC.jpg

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