amplification de phages

[invitee9934484]

Bonjour,
je me posais une petite question concernant le TP que j'ai réalisé, pouvez vous m'aider ?
Je me demandais pourquoi l'amplification du phage doit se faire dans des conditions où les bactéries sont en phase exponentielle de croissance ?
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[invitee9934484]

j'ai oublié... j'ai une autre petite question ^^
Lors de cette amplification du phage, nous ajoutons 100µl de CaCL2 + 100µl de solution de stock de phage à 5ml de bactéries. Puis on met sous agitation à 37°C pendant 24h.
Pourquoi met on la solution sous agitation ?

[invite74b9e03b]

Bonjour,

Les phages gèrent correctement leurs ressources à savoir les bactéries (contrairement à l'Homme ). Lorsque les bactéries sont en phase exponentielle (les ressources foisonnent) les phages se répliquent autant que possible (cycle lytique). Si les bactéries sont en phase stationnaire, si les phages continuent à se répliquer d'une telle manière, toutes les bactéries jusqu'à la dernière seront lysées ne laissant plus aucun hôte disponible et conduisant à la disparition des phages. Au lieu de cela les phages rentrent dans un cycle lysogénique, c'est à dire qu'ils intègrent leur génome à celui de l'hôte le laissant en vie, attendant ainsi la prochaine phase exponentielle pour se réactivé et reprendre sont cycle lytique. C'est la raison pour laquelle les phages sont de formidable contrôleur de la population bactérienne. Et jouent un rôle majeur en écologie.

Donc on cultive les phages lorsque les bactéries sont en phase exponentielle pour obtenir un maximum de phages .

Camu

[invitee9934484]

votre explication est très claire ! merci beaucoup !
Avez vous une idée en ce qui concerne l'agitation de cette suspension ?

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite74b9e03b]

Ravi d'avoir pu vous éclairé

En général lorsqu'on cultive des bactérie en milieu liquide on met sous agitation de manière à oxygéné le milieu de culture et garder les bactéries en suspension. Il peut y a voir d'autres raisons (je n'ai pas souvent affaire aux bactéries )

Camu

[invitee9934484]

Merci beaucoup !
J'ai encore une autre question à vous poser (je pense que c'est la dernière) : savez vous à quoi sert le calcul du facteur d'amplification (nb de phages après infection/ nb de phages avant infection) ?
J'ai calculé ce facteur (3,2.10⁵)mais je ne vois pas comment l'interpréter...

[invite74b9e03b]

Cela signifie que pour un phage infectant une bactérie, 3,2*10^5 phages seront produits.

Camu