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Expression de protéines



  1. #1
    pGEM-T

    Expression de protéines

    Bonjour tous,
    J'ai fait une expression de protéine taguée Histidine contenue dans un vecteur d'expression pTrcHis2B (protéine de Plasmodium falciparum) dans des bactéries d'expression Rosetta 2, seulement lors de l'extraction de cette protéine puis dépôt sur gel j'ai 2 tailles différentes de cette même protéine. Dans les protéines issues des fractions solubles j'ai une taille plus grande que dans celles des corps d'inclusion (fractions insolubles).
    Quelqu'un pourrait til me donner une explication pour la différence de tailles?

    Merci!

    -----


  2. #2
    Svenn

    Re : Expression de protéines

    Si tu es certain que les deux bandes correspondent à ta protéine (la mass spec est de loin la méthode la plus fiable, bien plus qu'un WB), tu as probablement eu une protéolyse spontanée. Il faudrait savoir si ta bande de plus haut poids correspond à la masse attendue pour ta protéine, auquel cas tu aurais de la protéine intacte en fraction soluble et de la protéine clivée en fraction insoluble.

  3. #3
    pGEM-T

    Re : Expression de protéines

    Merci bien Svenn, c'est bien ce que je pensais... Ca me rassure mais je souhaitais savoir si il existait d'autres explications.

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