Bonsoir,
Ceci est mon premier message sur ce forum, et après recherches je pense que les biochimistes présents ici pourront répondre à ma question
J'ai purifié un scFv taggé avec de la GST, et j'obtiens sous ma bande d'intérêt (vers 55 kDa) deux autres bandes (vers 35 et 45 kDa). Je suppose que c'est ma GST couplé au VH et au VL de mon scFv mais je ne connais pas la taille attendus des seuls fragments VH et VL. Quelqu'un peut-il m'aider ?
En vous remerciant par avance,
Tennistix.
Personne ne répond ça me fait de la peine
Si ta supposition est juste c'est simplement une équation à résoudre.
Appelons x la masse de VL, y la masse de VH et z la masse du GST
Le système d'équations que l'on obtient est :
x + y + z = 55 kDa
x + z = 35 kDa
y + z = 45 kDa
d'où on déduit que :
y = x + 10
on peut aussi reformuler la deuxième sous la forme :
z = 35 − x
Tu mets les deux nouvelles expressions de y et z dans la première équation, ce qui donne :
x + x + 10 + 35 − x = 55
soit x = 10 kDa
donc z = 25 kDa avec la 2e équation
et y = 20 kDa avec la 3e
Ce qui est cohérent avec les données biologiques, le GST devant faire 25~28 kDa selon l'isozyme et les masses de VL et VH m'ont l'air correcte.
Une question ?
Dernière modification par Syst. ; 10/06/2014 à 12h51.
Non aucune question c'était limpide
Merci beaucoup Syst.
Tennistix.
