Répondre à la discussion
Affichage des résultats 1 à 3 sur 3

Comment ajouter un petide signal à une proteine?



  1. #1
    mouton07

    Comment ajouter un petide signal à une proteine?

    Bonjour,

    je dois ajouter un peptide signal dont la séquence fait 70 bp à la CFP. Comment dois-je procéder? J'ai pensé faire 2 PCRs, une pour amplifier le peptide signal et une pour amplifier la CFP puis de faire une troisième PCR qui me permette de fusionner la cfp et le peptide signal. Mais j'ai peur de ne pas réussir a amplifier et purifier facilement mon peptide signal seul par PCR. est-ce possible? sinon est-ce que quelqu'un a déjà fusionné un signal peptide a une protéine?

    -----


  2. #2
    biseibutsu

    Re : Comment ajouter un petide signal à une proteine?

    Bonjour,

    Dans ce cas, le plus simple et efficace est effectivement de passer par la PCR.
    Mais deux seulement suffisent. La premiere, qui amplifie le peptide signal, avec sur une des amorces un site de restriction (cohesif), que tu rajouteras egalement sur le sequence de la CFP de la meme maniere (sauf bien sur si c'est une CFP "commercial", avec deja un bon choix d'enzyme qui coupe ou il faut).
    Tu peux ensuite purifier tes fragments, les digerer, les repurifier puis faire le clonage (transformation, amplification, verification) et hop, le tour est joue. Durer moyenne pour un tel clonage : une semaine max, sans compter le temps necessaire pour commander les amorces...
    微生物

  3. #3
    mouton07

    Re : Comment ajouter un petide signal à une proteine?

    tres bien, merci beaucoup pour ce conseil!

Sur le même thème :

Discussions similaires

  1. [Biologie Cellulaire] Protéine actives et code postal (signal).
    Par HusseinBerjaoui dans le forum Biologie
    Réponses: 3
    Dernier message: 12/12/2013, 23h31
  2. Réponses: 1
    Dernier message: 27/12/2012, 21h07
  3. ajouter +0.2volts sur un signal de sortie de capteur
    Par icedfluid59 dans le forum Électronique
    Réponses: 21
    Dernier message: 16/10/2012, 13h30
  4. Comment convertir un SIGNAL LONG en SIGNAL très COURT?
    Par biscoto66 dans le forum Électronique
    Réponses: 24
    Dernier message: 04/04/2012, 19h39
  5. [Biologie Cellulaire] Le signal de tri de protéine
    Par ILYESs dans le forum Biologie
    Réponses: 1
    Dernier message: 26/03/2009, 19h34