Méthode d'études d'une cellule

[invitea4ea6c13]

Bonsoir !

Je rencontre quelques difficultés sur ce chapitre et je n'arrive pas à comprendre cette partie sur l'autoradiographie :

Elle consiste à introduire dans les cellules vivantes un métabolite renfermant un atome radioactif. La cellule utilise ce métabolite marqué et celui non radioactif pour synthétiser des substances organiques qui seront marquées (pourquoi faire ? et pourquoi l'un est marqué et l'autre non radioactif ?).

Aussi, de toutes les méthodes d'étude de la cellule, si on nous donne une image de cellule et on nous demande quelle technique a été utilisée, comment différencier ?

Merci :
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[invitec9f0f895]

SAlut

Avec un exemple concret tu comprendras peut etre mieux.
Donne de l'UTP radioactif à une cellule, elle va pénétrer dedans etre utilisé dans la synthèse d'ARN et ainsi tous tes ARN seront marqués (mais pas ton ADN).
Apres ce que tu en fait dépend de la question que tu te poses au départ de l'expérience.

YOyo

[noir_ecaille]

Si vous n'utilisez que des métabolites radioactifs, le risque à prévoir est que le radionucléide se désintègre avant que les enzymes et récepteurs aient pu le prendre en charge. Or cela induit en mêmetemps une modofication chimique, puisque la désintégration radioactive va modifier le numéro atomique du radionucléide -- la réactivité chimique et même la structure de la molécule s'en trouveront modifiées. De fait, on va proposer à la cellule des métabolites marqués et non marqués, afin que la cellule continue de métaboliser, même si les radionucléides se désintègrent.

En revanche, cette fission nucléaire a un rayonnement intrinsèque mesurable, ce qui permet de suivre les concentrations de métabolite en suivant les zones où se concentrent les désintégrations de radionucléides. Cela permet par exemple des mesures de flux sanguin en imagerie cérébrale. Ou encore de localiser dans quel compartiment cellulaire certains métabolites sont utilisés ou pas.

Par contre je ne comprends pas trop ce que vous entendez par :

si on nous donne une image de cellule et on nous demande quelle technique a été utilisée

En générale on explique/présente toujours ce qu'on cherche à mettre en évidence dans des techniques d'imagerie, dont la méthode utilisée. À quelle genre de situation pensez-vous quant à devoir "deviner" une technique à partir d'une image ?


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EDIT : Grillée par Yoyo ^^;

[invite42bfda04]

Bonjour,

Il est nécessaire de mettre les 2 métabolites : le normal et le radioactif. Pour qu'une enzyme soit active il lui faut un minimum de concentration de molécules. Or, à ces doses on ne peut pas mettre que des molécules radioactives, ce serait trop dangereux pour la cellule et inutile pour ce qu'on veut faire.
Alors, on donne le substrat normal et très très très très peu de substrat radioactif qui sert de marqueur, on l'appelle aussi un traceur. (Je rassure noir_ecaille, quand on choisi bien le radiomarquage on peut avoir le temps de faire l'examen, certains sont stables des jours, voire des années...)

L'enzyme va faire son boulot de synthèse et prendre le métabolite normal et le radioactif sans faire de distinction entre les 2. On aura alors la synthèse des nouvelles molécules dont certaines seront radioactives et par autoradiographie on va pouvoir suivre leur devenir dans la cellule.

[A voir en vidéo sur Futura]