Polymerase Chain Reaction

[techfour]

Bonjour.

Je n'ai pas très bien compris le fonctionnement de la PCR et son objectif
Quelqu'un pourrait m'expliquer s'il vous plaît?
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[blisax]

Bonjour,

L'objectif d'une PCR est d'augmenter la quantité d'ADN pour la rendre plus facilement détectable expérimentalement. Pour ce qui est de la méthode: les brins d'ADN sont chauffé a 95°C, a cette température ils se dénaturent, on se retrouve donc avec deux brins monocaténaires. Ensuite a 60°C on hybride des amorces sur nos deux brins et a 72°C on introduit une enzyme -la taq polymerase- qui a partir des amorces va synthétiser les brins complémentaires. On se retrouve donc avec deux ADN bicaténaire donc 4 brins au total, on a doublé notre quantité d'ADN et on est prêt pour un nouveau cycle. Souvent on fait une petite trentaine de cycle.

[techfour]

Merci beaucoup blisax pour m'avoir éclairer sur le fonctionnement de la PCR.

Donc le phénomène de PCR est relié à l'hybridation in situ (FISH) ?
Car la PCR permet une détection plus simple de l'ADN, c'est ça?

[blisax]

Non le FISH et la PCR sont deux techniques très différentes et n'ont pas les mêmes objectifs mais utilisent tout les deux une hybridation. La PCR a pour but d'amplifier la quantité d'ADN pour le quantifier par exemple. Le FISH consiste a hybrider une sonde fluorescente complémentaire d'une séquence particulière dans le but de détecter des anomalies chromosomiques, par exemple si tu ne détectes un signal fluorescent que sur un chromosome pour la séquence qui t'intéresse dans un organisme diploïde cela signifie que la séquence a subit une délétion sur l'autre chromosome. Cela permet donc de faire des diagnostiques.

[A voir en vidéo sur Futura]

[techfour]

D'accord, merci beaucoup !