Bonjour,
Et oui encore une question de bio mol...
Bon alors j'ai besoin d'isoler les ARN totaux de cellules (fibroblastes plus precisement) en culture monolayer. J'utilise la methode du Trizol (popurquoi aller payer cher des kits alor que ca ca marche??). Mais comme je n'ai qu'un petit nombre de cellules, donc une petite quantite d'ARN, j'ai lu qu'il faudrait utiliser un carrier, coööe le glycogene.
OK mais est-ce que cela n'interfere pas avec les applications en aval (a savoir RT et Real time PCR)? La mesure de DO est-elle affectee?
Et si quelqu'un est familier avec cette technique, pourriez-vous m'indiquer quelle quantite de glycogene vous utilisez, et si il doit absolument etre certifie RNase-free. (dans la litterature ca varie beaucoup je trouve)
Merci d'avance pour votre aide...
a bientot
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