Bonjour à tous,
J'ai une petite question concernant le vecteur PGEMt. Ce vecteur comprend un site multiple de clonage (avec mon insert d'intérêt) ainsi que des sites d'initiation de la transcription T7 et SP6. Je me demandais s'il était nécessaire de linéariser le plasmide avant de faire agir les polymérases SP6 et T7 ou bien s'il est prévu dans le plasmide des sites d'arrêt de transcription. L'objectif étant de faire des sondes d'hybridation in situ ARN, et donc de transcrire le fragment d'ADN inséré
Je sais qu'il existe des sites de terminaison de la transcription (paires de GC, structures secondaires, signal de polyadénylation.. en fonction de si on se place chez des procaryotes ou des eucaryotes) mais j'ai beaucoup de mal à trouver l'information pour le vecteur PGEMt
Merci pour votre aide
R
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