mesure de l'activité de la lipase

[invite9dc9fa12]

Bonjour ;
Normalement je dois doser l’activité de la lipase et voila ce que j’ai fait :
J’ai préparer ma solution à doser et j’ai ajouter de la phénolphtaléine pr coloration et j’ai dosé par la solution de NaOH 0,05 N
Le changement du couleur a eu lieu à 1,1 ml de NaOH
Voila c’est tout ce que je fais ….
Maintenant on me demande de calculer l’activité enzymatique étant donné que : Une unité de la lipase a été définie comme la quantité d'enzymes, qui libère 1 µmol d'acide gras/min (1 ml de NaOH 0,05 équivaut à 100 mol d'acide gras libéré par minute)

Que dois je faire !!!!!!!!!


N.B : je n’ai pas effectuer la spectro et je ne px pas la faire maintenant
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[inviteb5b3ec63]

Bonjour,

Unité lipase = qté d'enzyme qui libère 1 µmol d'AG / min

Tu sais que :

1 ml de NaOH (0.05 M) -> 100 moles d'AG libéré / min
Donc 1 µl de NaOH (0.05M) -> 100 µmoles d'AG libéré / min
0.01µl de NaOH (0.05M) -> 1µmoles AG libéré / min


Néanmoins il manque des données ;
- En combien de temps la réaction enzymatique s'est faite ?
- la quantité de substrat enzymatique que tu doses ?
- est tu sur qu'un ml de NaOH a 0.05 M => 100 mol d'AG libéré en 1 minute ? ça me parait énorme

[invite9dc9fa12]

tout d'abord je vous remercie d'avoir répondre à mon message.

j'ai commis une faute de frappe; il s 'agit de 1 ml de NaOH 0,05 équivaut à 1 µmol d'acide gras libéré par minute.

en ce qui concerne le temps de la réaction, en fait la titration n'a même pas pris une minute en total li virage de la couleur ( du transparent au rose) est faite en qlq secondes avec seulement 0,11 ml de NaOH.
pour le substrat j'ai doser 200 µl.


En cherchant sur internet j'ai trouver cette relation qu'elle me parait normale mais je n'ai pas pu l'utiliser puisqu'elle n'est pas cité dans les articles dont je fais référence


Units/ml enzyme = (NaOH)(Molarity of NaOH)(1000)(2)(df) / (1)


(NaOH) = Volume (in milliliters) of Reagent E used for Test minus volume (in milliliters) of Reagent E used for Blank.
1000 = Conversion factor from milliequivalent to microequivalent
2 = Time conversion factor from 30 minutes to 1 hour (Unit Definition)
df = Dilution factor
1 = Volume (in milliliter) of enzyme used