Salut !
Dans mon stage où je dois visualiser les profils d'acyles-CoA en LC/MS-MS, je dois traiter des culots de cellules de malade MCAD ( maladie où la protéine MCAD subit des mutations l’empêchant de dégrader des acides gras à chaine moyennes lors de la réaction de beta oxydation, et entrainant leur accumulation).
Le problème c'est que je veux visualiser le défaut qui sera représenté par une accumulation des acides gras à chaines moyennes, mais ce défaut risque d’être mal vu à cause d'une possible activité résiduelle de l’enzyme qui dégrade des acides gras et du coup je verrais pas l'accumulation de ces dernier attendue.
j'ai pensé à éliminer cette activité résiduelle en confrontant les cellules à un choque de température élevée ou utiliser de l’acétonitrile, il y a aussi une troisième possibilité dont je suis pas encore sure c'est de faire un choque de température bas dans l'azote par exemple...
Pouvez vous m'aider s'il vous plait si vous avez déjà été confronté à ce problème, quelle est la méthode qui parait la mieux et si vous avez d'autres idées testées plus efficaces merci ^^
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