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Enzyme Taq polymérase et réaction de PCR



  1. #1
    JaneJone

    Enzyme Taq polymérase et réaction de PCR


    ------

    Bonjour,
    J'aurais une question concernant la réaction de PRC. On utilise 2 amorces une sens et une anti-sens pour délimiter la séquence spécifique à amplifier. Chacune des alors s'hybride sur un brin après dénaturation du double brin. Puis L'enzyme Taq polymérase rajoute les désoxynucléotiques complémentaires , mais comment sait-elle quand elle doit s'arrêter ?
    Merci pour votre réponse

    -----

  2. #2
    Flyingbike

    Re : Enzyme Taq polymérase et réaction de PCR

    elle ne sait pas

    mais au cycle d'après, c'est l'autre amorce qui s'hybride sur le brin néosynthétisé et la Taq va dans l'autre sens, jusqu'à l'endroit ou l'amorce du cycle précédent s'était fixée

    Au final on a une très large majorité de produits dont la taille est bornée par les amorces

    voir ici fig. 5
    http://www.nlv.ch/Molbiology/sites/PCRprinciples.htm
    La vie trouve toujours un chemin

  3. #3
    JaneJone

    Re : Enzyme Taq polymérase et réaction de PCR

    D'accord, merci pour votre réponse. Est ce que cela veut dire qu'on a toujours la même taille de brin néosynthétisé ? Les amorces encadrent la séquence à amplifier sur le même brin , ou on utilise les amorces sens et antisens pour les 2 brins ( 1 seule pour chaque brin dans 1 cycle ) ?

  4. #4
    Flyingbike

    Re : Enzyme Taq polymérase et réaction de PCR

    non il y a une amorce complémentaire de chaque brin

    Selon ce qu'on amplifie on n'a pas forcément qu'une taille de fragment, en fonction de ce qui se trouve entre les deux amorces
    La vie trouve toujours un chemin

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