Bonjour,
J'aurais une question concernant la réaction de PRC. On utilise 2 amorces une sens et une anti-sens pour délimiter la séquence spécifique à amplifier. Chacune des alors s'hybride sur un brin après dénaturation du double brin. Puis L'enzyme Taq polymérase rajoute les désoxynucléotiques complémentaires , mais comment sait-elle quand elle doit s'arrêter ?
Merci pour votre réponse
elle ne sait pas
mais au cycle d'après, c'est l'autre amorce qui s'hybride sur le brin néosynthétisé et la Taq va dans l'autre sens, jusqu'à l'endroit ou l'amorce du cycle précédent s'était fixée
Au final on a une très large majorité de produits dont la taille est bornée par les amorces
voir ici fig. 5
http://www.nlv.ch/Molbiology/sites/PCRprinciples.htm
La vie trouve toujours un chemin
D'accord, merci pour votre réponse. Est ce que cela veut dire qu'on a toujours la même taille de brin néosynthétisé ? Les amorces encadrent la séquence à amplifier sur le même brin , ou on utilise les amorces sens et antisens pour les 2 brins ( 1 seule pour chaque brin dans 1 cycle ) ?
non il y a une amorce complémentaire de chaque brin
Selon ce qu'on amplifie on n'a pas forcément qu'une taille de fragment, en fonction de ce qui se trouve entre les deux amorces
La vie trouve toujours un chemin
