Bonjour,
J'aimerais extraire mes proteines recombinantes de mon mutant BL21, pour cela j'aimerais eviter les methodes classiques d'extraction (tampon et sonication).
J'ai eu comme idée d'eclater les bactéries au micro onde, avez vous déjà testé? Est ce que la proteine recombinante restera intacte? Qu'en pensez vous? Sinon quels sont vos protocoles d'extraction ?
Merci
Lel'
pourquoi vouloir éviter les méthodes classiques ?
pour le micro ondes je ne suis vraiment pas convaincu.... les protéines risquent de se dénaturer (et ça va puer...)
La vie trouve toujours un chemin
Je rejoins l'avis de Flying, pourquoi vouloir éviter les techniques classiques ? La sonication ou la french-press sont quand mêmes les méthodes les plus adaptées à la lyse des bactéries.
le micro-onde sera très crtainement nocif pour tes protéines
Juste par curiosité lel vous bossez sur quoi et où ? (Mp si vous voulez)
La vie trouve toujours un chemin
J'aimerais produire de la Taq polymérase, j'ai finalement choisi la souche Mach1. J'aurais aimé une méthode d'extraction/ purification rapide, simple et efficace. Quels sont vos protocoles ?
