La carte de restriction

[Sumiin]

Est-ce qu'il y a quelqu'un qui peut m'aider avec ces exercices?
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J'ai besoin d'aide pour comprendre le concept de savoir quel fragment vient en premier
disons que nous avons une molécule de l'ADN linéaire de 15 kpb la digestion de celui-ci par trois enzymes nous donne quelque chose comme ça
BamHI: 14 et 1
EcoRI: 12 et 3
PstL 8 et 7
BamHI et ExoRI: 11, 3 et 1
BamHI: 8, 6 et 1
EcoRI et PstI: 7, 5 et 3
BamHI + EcoRI + PstI: 6, 5, 3 et 1
quand nous faisons le panier de restriction, c'est comme ça:
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pourquoi avons-nous dit effets de BamHI en 14 quand nous aurions pu le dire l'effets est en 1 à la place
Je suis si confus
-----

[blackheartart]

Moi je suis pas très bien en biologie moléculaire mais je peux dire que cette enzyme a deux site de restictions, 14 et 1 ?

[dalmia]

Bonjour,

Si ton ADN est linéaire et que la digestion par une enzyme (exemple Bam HI) génère deux fragments (de 14 et 1 kpb), ça veut dire qu'il n'y a qu'un seul site pour cette enzyme =) comme un fil qu'on coupe en deux une seule fois : on se retrouve avec deux morceaux.

Avec cette info : "BamHI: 14 et 1"
On peut dessiner ça (avec chaque tiret qui représente 1 kpb) : --------------BamHI-

On te donne aussi :
"EcoRI: 12 et 3"
"BamHI et EcoRI: 11, 3 et 1"
La coupure EcoRI permet d'obtenir deux fragments, donc il y a un seul site EcoRI. C'est concordant avec coupure par deux enzymes qui génère 3 fragments (un site de restriction pour chaque enzyme).
On a deux possibilités :
* soit ---EcoRI-----------BamHI- (ça nous donne dans l'ordre des fragments de taille 3, 11 puis 1)
* ou alors -----------EcoRI---BamHI- (dans l'ordre : 11, 3 puis 1).

Si on te dit qu'une coupure par EcoRI génère un fragment de 12 et un autre fragment de 3, tu peux choisir non ?

Dalmia

PS : je suis sur mon téléphone et c'est trop galère de regarder les pièces jointes, mais j'espère quand même te lancer sur une piste. C'est plus de la logique que de la bio mol

[dalmia]

Bonjour,

Si ton ADN est linéaire et que la digestion par une enzyme (exemple Bam HI) génère deux fragments (de 14 et 1 kpb), ça veut dire qu'il n'y a qu'un seul site pour cette enzyme =) comme un fil qu'on coupe en deux une seule fois : on se retrouve avec deux morceaux.

Avec cette info : "BamHI: 14 et 1"
On peut dessiner ça (avec chaque tiret qui représente 1 kpb) : --------------BamHI-

On te donne aussi :
"EcoRI: 12 et 3"
"BamHI et EcoRI: 11, 3 et 1"
La coupure EcoRI permet d'obtenir deux fragments, donc il y a un seul site EcoRI. C'est concordant avec coupure par deux enzymes qui génère 3 fragments (un site de restriction pour chaque enzyme).
On a deux possibilités :
* soit ---EcoRI-----------BamHI- (ça nous donne dans l'ordre des fragments de taille 3, 11 puis 1)
* ou alors -----------EcoRI---BamHI- (dans l'ordre : 11, 3 puis 1).

Si on te dit qu'une coupure par EcoRI génère un fragment de 12 et un autre fragment de 3, tu peux choisir non ?

Dalmia

PS : je suis sur mon téléphone et c'est trop galère de regarder les pièces jointes, mais j'espère quand même te lancer sur une piste. C'est plus de la logique que de la bio mol

[A voir en vidéo sur Futura]