Bonjour,
je fais maintenant de la culture cellulaire ainsi que la transfection et je dois avouer que j'ai beaucoup de mal avec le calcul de la concentration de cellules. Après centrifugation j'ai repris le culot cellulaire dans 10ml, après la lecture au compteur automatique de cellules, j'ai une concentration cellulaire de 1.480.000 cel/ml. Sachant que pour ma tranfection j'ai besoin de 125.000 cel par puits.
j'ai tenté d'utiliser la formule CiVi=CfVf mais bon j'ai un doute.
Bonjour,
Pour le moment, vu ce que tu présente, tout va bien. Cependant il nous manque quelques données, notamment le nombre de puits et le volume que tu dois mettre dans ces puits.
Prenons un exemple de plaque 96 puits dans laquelle on met 100 uL de milieu. Il faut donc 96 x 0,1 mL = 9,6 mL de milieu pour remplir la plaque. Comme il faut toujours un peu de marge en cas d'erreur de pipetage et pour compenser le volume mort du tube, on va prendre 11 mL de volume final.
Maintenant, il faut faire en sorte que lorsque tu prélève 100 uL pour les déposer dans la plaque, ces 100 uL contiennent 125 000 cellules. 125000 cell/100 uL = 1 250 000/mL.
On a donc Ci= 1 480 000 cell/mL ; Vf= 11 mL ; Cf= 1 250 000 cell/mL. Il faut donc Vi = 9,29 mL de cellules auquels on ajoutera 1,71 mL de milieu.
J'espère avoir été clair.
Re : Calcul culture cellulaire
Bonjour! Oui vous avez été très clair. Merci infiniment
