Biologie moléculaire

[invitecb19639a]

Bonjour, j'ai un DM a rendre pour demain et je suis bloqué sur 3 questions. j'espère pouvoir retrouver de l'aide ici. merci d'avance.

Voici les questions:

1- Vous devez préparer 150 mL de gel d'agarose, contenant du bromure d'éthidium à la concentration finale de 0,5 µg/mL. Quel volume devez-vous prélever à partir de la solution mère, sachant que sa concentration est de 10 mg/mL ?
(NB: vous devez justifier votre résultat en donnant les étapes intermédiaires de votre calcul.)



2- vous devez préparer 2,5L de tampon de migration correspondant à du tAE 0,5x. quel volume devez-vous prélever à partir de la solution mère, sachant que sa concentration est de 10x ?
(NB: vous devez justifier votre résultat en donnant les étapes intermédiaires de votre calcul.)



3- Vous devez préparer 150 mL de gel à 1,2% d'agarose; Quelle quantité d'agarose devez-vous peser ?
(NB: vous devez justifier votre résultat en donnant les étapes intermédiaires de votre calcul.)


Je vous remercie pour votre aide.
-----

[Flyingbike]

C'est simple, c'est le même raisonnement a chaque fois

Vous avez une concentration de départ (celle du "stock"), et une concentration finale (voulue)

Entre les deux, un facteur de dilution.


Pour réaliser votre solution il faut donc appliquer ce facteur de dilution, voici un exemple

j'ai du pastis à 45% d'alcool

Je veux une boisson à 15% d'alcool, dans un verre de 30cl

Ici, le facteur de dilution est 45/15 = 3 (oui j'aime le pastis fort), c'est à dire qu'on dilue 3 fois.

Comment on dilue par 3 dans un verre de 30 cl ?

On y met 30cl/3 = 10cl de pastis, et on complète avec de l'eau (30-10=20)
Simple non ?

Une autre façon de voir, c'est de regarder la conservation de la matière. C'est illustré par la formule

Ci x Vi = Cf x Vf

La quantité de matière avant et après dilution (donc égale au produit du volume par la concentration) ne change pas. Seul le volume, donc la concentration, changent

Dans notre cas
45% x 10mL = 15% x 30mL

De façon générale, on calcule le volume a prélever par Vi = Cf x Vf / Ci

Je vous laisse appliquer cela aux deux premiers exemples




Pour le 3 : il faut savoir que quand on prépare une solution contenant un solide (l'agarose), on donne la concentration en masse/volume. C'est à dire que pour 150mL de solution, 1,2% de la masse est de l'agarose. Il faut donc connaître la masse de la solution, et calculer ce que représente 1,2% de cette masse

[invitecb19639a]

Re, merci pour votre retour.
donc pour le 1er et le 3ème est ce que c’est bien cela ?

1. volume de gel en mL * BET (0.5µg/mL)/concentration (µg/ml)
150*0.5/10=7.5µL

3. volume de gel en mL * dose agarose en %/100
150*1.2/100=1.8g

merci encore une fois

Pravin