[Microbiologie] Relation DO/Comptages cellulaires
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Relation DO/Comptages cellulaires



  1. #1
    fourchetteetcouteau

    Relation DO/Comptages cellulaires


    ------

    Bonjour,

    j'ai suivi une culture d'algues par DO et comptages sur cellules de Malassez. Je dois établir une relation DO/comptages. On m'a dit de mettre les comptages en log et de faire un graphe avec en abscisse la DO et en ordonnée l'abondance celllulaire. Je dois avoir une régression linéaire de type 2 passant par 0 normalement.

    Je sais que c'est une fonction de type "abondance cellulaire = a x DO + b" mais concrètement je ne sais pas comment procéder pour l'obtenir sur mon logiciel excel...

    Je dois par la suite déterminer ma biomasse maximale avec la "DO transformée en abondance cellulaire"...


    Sur excel j'ai tracé un graphe (nuage de points) avec la DO en abscisse et mes abondances (cells/mL) loguées (log) en ordonnées et j'ai mis une "courbe de tendance linéaire", l'équation de la droite est y = 2,0595x + 6,2766. S'il y a "+6,2766" cela veut dire que ça ne passe pas par zéro... Je suis un peu perdue...

    Merci d'avance

    -----

  2. #2
    fourchetteetcouteau

    Re : Relation DO/Comptages cellulaires

    Jour Comptage (Y) DO (X)
    3 3,54E+06 0,028100001
    5 2,19E+06 0,057166668
    6 2,73E+06 0,056099998
    7 1,75E+06 0,103533333
    10 2,75E+06 0,095300004
    11 3,44E+06 0,116833334
    12 3,13E+06 0,127066667
    13 3,01E+06 0,13
    14 3,55E+06 0,142500003
    17 5,84E+06 0,191166664
    18 5,72E+06 0,266299998
    19 1,11E+07 0,310066675
    20 8,02E+06 0,301666662
    21 9,60E+06 0,355766659
    24 1,11E+07 0,379599993
    25 1,16E+07 0,382300004
    26 1,16E+07 0,410500005
    27 1,35E+07 0,401399995
    28 1,57E+07 0,44403333
    31 1,96E+07 0,454900001
    32 2,32E+07 0,435466662
    33 2,14E+07 0,497499997
    34 1,77E+07 0,522533312
    38 1,91E+07 0,537133351
    40 2,65E+07 0,561166659
    42 2,47E+07 0,541233336

    Voilà une de mes croissances, j'ai testé plein de choses mais je ne vois pas comment procéder.

    Merci

  3. #3
    Flyingbike
    Modérateur*

    Re : Relation DO/Comptages cellulaires

    il y a un souci avec vos données je pense. Si on extrapole vers DO ->0, on est très très loin d'être à zéro comptage.

    Vous êtes sure des données ?
    La vie trouve toujours un chemin

  4. #4
    fourchetteetcouteau

    Re : Relation DO/Comptages cellulaires

    Merci pour votre réponse,

    mes données ont été moyennées à partir de triplicats qui avaient un écart-type parfois grand. Je pense que cela peut jouer la dessus. En plus les mesures ont été réalisées tous les jours et non pas à partir d'une dilution sérielle, j'ai eu parfois du mal à faire les comptages sur cellule de Malassez car les cellules formaient des agrégats. J'ai effectué mes comptages en comptant au moins 100 cellules, 3 fois par culture.

  5. A voir en vidéo sur Futura
  6. #5
    Flyingbike
    Modérateur*

    Re : Relation DO/Comptages cellulaires

    la modélisation linéaire n'est pas mal, mais en principe la concentration est proportionnelle à la densité optique, au moins dans une certaine fourchette.

    Ce qui est embêtant c'est que vous êtes très très loin de passer par zéro....


    Images attachées Images attachées  
    La vie trouve toujours un chemin

  7. #6
    fourchetteetcouteau

    Re : Relation DO/Comptages cellulaires

    Oui, concrètement cela veut dire que même à une Do de 0 y aurait des cellules... pourtant j'ai retiré la DO du milieu de culture dans mes données pour n'avoir que la DO des cellules.

  8. #7
    Flyingbike
    Modérateur*

    Re : Relation DO/Comptages cellulaires

    a quelle longueur d'onde avez vous lu ?
    La vie trouve toujours un chemin

  9. #8
    fourchetteetcouteau

    Re : Relation DO/Comptages cellulaires

    J'ai lu à 680nm, pour les milieux de culture seuls et les cultures avec algues.

  10. #9
    Flyingbike
    Modérateur*

    Re : Relation DO/Comptages cellulaires

    en 3 jours, vous parvenez à 10E6, mais en 42 jours vous n'avez gagné qu'un log ?

    Je ne suis pas familier avec les algues mais il y a un truc qui m'échappe....


    Vous partez avec quel inoculum ?
    La vie trouve toujours un chemin

  11. #10
    fourchetteetcouteau

    Re : Relation DO/Comptages cellulaires

    à J0 (juste après avoir inoculé) la DO à 680 nm (avec la DO du milieu soustrait) était à 0,245. Je pensais que la croissance (les 4 phases) prendrait environ 15 jours mais les algues ont mis environ 10 jours avant de commencer à pousser, le dernier repiquage datait d'un mois, elles étaient peut être pas très en forme.

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