principe de transformation des levures?
Bonjour
je débute un apprentissage de laborantine en biologie et j'ai beucoup de mal, car nous commençons à apprendre le contenu et le fonctionnement d'une cellule en cours alors qu'au boulot c'est un niveau nettement plus élevé
par pitié
est-ce que quelqu'un pourrait m'expliquer de façon simple le principe de la transformation des levures???
pasque là...
merci
Quesque tu enttend par transformation?
Tu veux dire la division?
Non pardon j'ai compris tu parle de transformation génétique par plasmide non?
Si c'est ça le principe est pas trop compliqué,tu introduit un plasmide bactérien modifier compartant le géne que tu veux introduir dans ta cellule qui aurra préalablement était rendu perméable grace à un tampon ( enfin je crois que c un tampon?! non).
pour ceux qui est du plasmide l'introduction du géne se fait a l'aide d'enzymes de restriction spécifique qui coupe ton plasmide au niveau des séquence souhaiter et tu peux ainsi introduir ton géne.
J'éspére que c'est clair et que c'est se que tu cherches mais mes connaissances en plasmide remonte de la fac alors désolé si c'est pas trop clair.
Etape importante on utilise des sphéroblastes : c'est-à-dire des levures dépourvues de paroi (tout l'assemblage de sucres et de protéines au-delà de la membrane plasmique), on les obtient par réaction enzymatique (pectinases ??? je ne sais plus)
Jean-Luc
La violence est le dernier refuge de l'incompétence.
Salvor Hardin
Envoyé par Jean-Luc P
Je me suis renseigné, c'est une lyticase qu'on utilise pour former les sphéroblastes .
Paul .
Bonsoir,
A moins de cas particuliers les spheroblastes ne sont quasiment plus utilisés pour les transfos de levure. On utilise plutot le protocole utilisant du PEG et du LiAc qui est beaucoup plus simple car il evite la necessité de passer par des spheroblastes.
Yoyo
merci beaucoup lililala, c'était bien ce que je voulais savoir.
et merci à tous les autres pour vos précisions.
le labo ou je travaille fait de la recherche fondamentale et utilise pour celà des levures.
mais pour l'instant c'est un peu dur pour moi de comprendre tout çaalors je fais des recherches quand je rentre chez moi pour mieux comprendre.
donc on se recroisera car je viendrais sûrement encore vous demander vôtre aide au cas où
en tout cas merci
J'ai pas mal de cours sur les stratégies génétiques (niveau M1) et j'aimerai connaitre cette technique dont du parles si tu peux résumer en quelques lignes le principe , avantages et inconvéniants .
salut
le principe est tres simple le PEG et le LiAc perméabilisent la membrane de le levure, ensuite grace a un choc thermique l'ADN pénettre dans la cellule.
Yoyo
