Bonsoir, je révisais pour mon examen de TP de culture in vitro quand je me suis aperçu que j’avais des lacunes sur le raisonnement en chimie. Je recopie un sujet d’annales avec exclusivement la partie chimie. La partie biologie, ça ne m’a pas posé de problème, c’est ma filière la biologie justement.
En fait, à faire bêtement en TP les solutions sans chercher à savoir comment les préparateurs les avait préparées, ça risque de nous jouer des tours pour la partie calculs à l’examen donc j'avais décidé de m'entraîner avec les annales.
Objectif : réaliser un milieu de 500 mL avec les constituants suivants.
constituants concentration Masse molaire (g.mol-1)
Agar 6 g.L-1
NH4NO3 5 mM 80,04
H3BO3 100 µM 61,83
BAP 1 µM 225,25
Saccharose 58,43 µM 342,3
Pyridoxine 2,5 µM 205,6
Matériel : balance de précision capable de peser au mg près, fioles jaugées et pipettes graduées.
En tenant compte du matériel mis à votre disposition, vous présenterez les calculs des quantités de chacun des constituants permettant la préparation de ce milieu de culture (formule littérale demandée avant l’application numérique). Vous tiendrez compte de la précision du matériel.
Je sais qu’avec ce matériel, il est impossible de :
- peser moins de 10 mg
- peser plus de 10 g
- impossible de prélever un volume inférieur à 20 µL
Pour l’agar, pas de problème vu que le milieu est d’un demi litre, j’en déduis qu’il me faut peser 3 g vu sa concentration.
La formule littérale pour les solutions doit être m = c X volume désiré X masse molaire, c’est bien ça ?
Du coup, en TP on utilisait un facteur de concentration afin de rendre les pesées possibles (si le chiffre obtenu n’est pas valable pour la pesée).
Ainsi :
m NH4NO3 = 5 X 10-3 * 0,5 * 80,04 = 0,20001 g = 200,01 mg => non pesable (facteur requis !)
m H3BO3 = 100 X 10-6 * 0,5 * 61,83 = 3,0915 X 10-3 g => non pesable (facteur requis !)
m BAP = 1 X 10-6 * 0,5 * 225,25 = 1,12615 X 10-4 g => non pesable (facteur requis !)
m saccharose = 58,43 X 10-6 * 0,5 * 342,3 = 1,12615 X 10-4 g => 0,010000294 g (facteur requis !)
m pyridoxine = 2,5 X 10-6 * 0,5 * 205,6 = 1,12615 X 10-4 g => 2,57 X 10-4 g (facteur requis !)
Là, on doit multiplier par 10, 100, 1 000 jusqu’à atteindre une masse pesable et ensuite entre en jeu la relation entre solution mère et solution fille.
Ci Vi = Cf Cf
Ci / Cf = Vf / Vi.
Or, Ci / Cf = facteur de concentration.
Par exemple, si le facteur de concentration est de 100, j’aurai 100 = 500 (mL) / Vi.
Vi = 500 / 100 = 5 mL.
Voilà, merci de m’éclairer de vos lumières pour me dire où j'aurai pu me tromper dans le raisonnement et si c'est possible le compléter.
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