tp biochimie
en tp de biochimie, on avait un mélange de peroxydase (7,5mg/mL) et de phosphatase alcaline (7,5mg/mL)qu'on a fait passer dans une colonne de chromatographie d'affinité avec un tampon d'accrochage (donc sensé accrocher la phosphatase alcaline dans la colonne et éluer la peroxydase qui est recueillie par fraction de 0,5ml).
puis l'absorbance de ces volumes éluées sont mesurés par spectrophotometrie à 280nm et 440nm.
je ne comprends pas pourquoi utiliser ces 2 longueurs d'ondes?? (je sais que 280nm c'est pour detecter les proteines en general mais pourquoi 440nm??)
en tracant l'absorbance en fonction du volume élué, peut-on avoir 2 courbes superposables pour les 2 longueurs d'ondes?
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