HPLC-gel d'exclusion

[invite24ceee8b]

Bonjour,
J'ai un problème qui ressemble à un posé dans le forum. "Hplc".
Dans mon cas, je travaille sur une colonne gel d'exclusion en HPLC. Après une journée d'élution d'échantillions (dans le tampon HEPES à 0.5 ml/min), la pression s'est beaucoup augmentée. Ainsi, j'ai arrêté l'élution et j'ai commencé de passer la phase mobile à 0.1 ml/min pendant 12 heures. La pression s'est augmenté d'avantage.
Alors, j'ai passé l'eau pendant plus que 7 heures et la pression s'est augmenté d'avantage.
La colonne est un gel TSK (30cmx7.5mm).
Pouvez vous m'aider à trouver une explication.
Merci
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[invite75a6eeed]

Ta colonne ou un de tes tubes de jonctions doit etre bouché. Déconnectes tout bout par bout et regarde la pression. La pression est quasi nulle si la colonne est débranchée et très faible avec la colonne si une autre partie est débranchée.

[invitec86aa7a5]

bonjour
n'y a t'il pas des bulles d'air dans ta colonne qui pourrait expliquer l'augmentation de pression...