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Question Chromatographie.



  1. #1
    DimiNux

    Smile Question Chromatographie.


    ------

    Bonjour, la chromatographie des acides aminés (Tyroside, Proline, Valine et Glycine) sur CCM donne des Rf et des couleur différente (le réactif utiliser est ninhydrine je crois).

    Ma question est: Quelle est à l'origine de la différence des couleur observer sur la chromatographie? c'est leur structure?

    Merci d'avance bonne journée.

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  4. #2
    Grupinette

    Re : Question Chromatographie.

    Bonjour,
    Avec la ninhydrine tous les acides aminés sont colorés en violet sauf la proline qui est colorée en jaune. La ninhydrine réagit avec les amines primaires, or la proline contient une amine secondaire d'où la différence de coloration !

  5. #3
    DimiNux

    Smile Re : Question Chromatographie.

    Merci d'avoir répondu,
    Mais on remarque sur la chromatographie, la valine est coloré en rouge violacé effectivement, mais la Glycine est plutôt oranger pourquoi?

    Et une dernière question, pourquoi les taches de la valine et tyrosine migre plus haut que la valine et la glycine? (le front du solvant est quasiment droit)

  6. #4
    Grupinette

    Re : Question Chromatographie.

    La ninhydrine réalise une oxydation désaminante de la fonction alpha-amino. L'ammoniac libéré réagit avec une autre molécule de ninhydrine pour donner la molécule colorée appelée pourpre de Ruhemann. Dans le cas de la proline la fonction alpha-amino n'est pas libre donc il n'y a pas de libération d'ammoniac donc pas de coloration pourpre ! Dans le cas de la glycine il y a bien libération d'ammoniac donc coloration pourpre ! Cependant s'il n'y en a que très peu ça peut apparaître orange mais je ne suis pas convaincue !

    Ensuite la migration dépend de la différence d'affinité qu'a l'acide aminé pour l'éluant ! En jouant sur l'acidité de l'éluant les hauteurs de migration seront différentes.

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  8. #5
    DimiNux

    Re : Question Chromatographie.

    Merci de m'avoir aider Grupinette =)

  9. #6
    Grupinette

    Re : Question Chromatographie.

    De rien

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  11. #7
    future-med

    Re : Question Chromatographie.

    Mais la proline , glycine et alanine étant tous des acides aminés apolaires pourquoi ne migrent-ils pas tous de la même façon ? C'est l'affinité à la phase mobile qui fait la différence? Mais alors qu'est ce qui détermine cette affinité?(qu'est ce qui fait que parmi deux acides aminés apolaires l'un a plus d'affinité pour l'eau ou au solvant)

  12. #8
    Oumin

    Re : Question Chromatographie.

    Svp pourquoi la proline ne se colore pas en jaune?et est ce qu on travaille avec la ninhydrine comme reactif ?

  13. #9
    Oumin

    Re : Question Chromatographie.

    Svp pourquoi la proline ne se colore pas en mauve?et est ce qu on travaille avec la ninhydrine comme reactif ?

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