Chromatographie HPLC

[justinethe]

Bonjour,

Je fais appel a vous aujourd'hui car je suis complètement perdue avec un des exercices que j'ai à rendre. On me demande " L'identité et la quantité d'un ou plusieurs anesthésiques locaux doivent être déterminées à partir des données brutes (chromatogrammes d'analyse HPLC et chromatogrammes de référence)". Je suis cette année en Erasmus dans une fac allemande et je n'ai jamais fait ça en France, et je ne sais pas comment faire pour trouver a partir d'un chromatogramme de référence de quelle substance il s'agit dans mon chromatogramme expérimental. J'ai cherché des informations sur internet mais je n'ai rien trouvé.
Pourriez vous m'aider? (le document avec deux chromatogrammes est celui avec la substances à déterminer et celui avec plusieurs chromatogrammes sont les chromatogrammes de référence)

Merci d'avance!

Justine
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[HarleyApril]

Bonjour

Les temps de rétention vont te servir à identifier les composés.
Tu vas donc pouvoir identifier chaque pic à l'aide de son temps de rétention en retrouvant un temps très voisin dans le document de calibration.

Par ailleurs, pour déterminer les teneurs, tu vas te servir du document de calibration : la surface est proportionnelle à la quantité injectée. Les quantités des produits purs sont indiquées dans la calibration. Ceci te permettra de calculer les quantités de chaque composant dans le mélange.

Bonne continuation

[Kiraxel]

Tiens j'en profite pour poser une question, qui peut aussi servir à justinethe : les % qu'on détermine en chromatographie, à partir de la comparaison des aires des pics, est ce que c'est un pourcentage molaire ou bien un pourcentage massique ?

[sfnsfn2]

Bonjour,
pour l'analyse quantitative, faire attention : facteur de dilution et la masse exacte pesée.

[A voir en vidéo sur Futura]

[HarleyApril]

Tiens j'en profite pour poser une question, qui peut aussi servir à justinethe : les % qu'on détermine en chromatographie, à partir de la comparaison des aires des pics, est ce que c'est un pourcentage molaire ou bien un pourcentage massique ?

Le résultat brut en pourcentage d'aire n'est ni molaire ni massique car il dépend du coefficient d'extinction de chaque constituant !

D'où la nécessité de faire un étalonnage ou de déterminer les facteurs de réponse.


Cordialement