extraction du plasmide PNIL002 et digestion enzymatique par EcoRI
Bonsoir à tous!
Au cours d'un TP, on a effectué une digestion enzymatique du plasmide d'E.coli (par l'enzyme EcoRI). On a ensuite analysé le plasmide digéré et non digéré par électrophorèse (photo jointe) Pièce jointe 0
je n'arrive pas à bien comprendre les résultats obtenus et les interpréter correctement, quelqu'un pourrait m'aider
merci d'avance pour votre aide
Dernière modification par mh34 ; 19/01/2016 à 11h22. Motif: correction faute de frappe titre
C'est quoi les colonnes ?
La vie trouve toujours un chemin
De A à I: répétitions (au dessus plasmide non digéré et en dessous le plasmide digéré)
SM: Smart Ladder
Salut
Déjà tu pourrais commencer par nous dire ce que tu comprends de ce gel et ce qui te pose probleme.
YOyo
Ce que je comprends c'est qu'on a découpé le plasmide ce qu'on doit voir en analyse du plasmide non digéré c'est des bandes dans la partie supérieure ( taille grande) et pour l'analyse du plasmide digéré on doit voir plusieurs petites bandes dans la partie inférieure (taille petite)
Ce qui me pose problème c'est les grosses tâches (plasmide non digéré) situées dans la partie inférieure (plasmide non digéré a migré si loin?) et pour le plasmide digéré je devrais avoir des bandes (de petite taille). ce que je vois c'est la réduction du plasmide mais les bandes sont situées dans la partie grande taille
En gros je ne sais pas comment interpréter les résultats puisque je ne comprends pas les résultats !
Salut
Alors les grosses taches blanches que tu vois dans le gel du haut sont des ARN que tu as récupérés en meme temps que tu as fait ta miniprep de plasmide.
D'ailleur tu vois que dans les pistes B et G ou l'extraction a mal marchée il n'y en a pas dans la partie basse du gel.
Sais tu a quoi correspondent les différentes bandes que tu vois dans le gel non digéré?
Sinon pour celui du bas, tu vois que dans ta piste A il y a deux bandes hautes qui montrent que ce n'est pas le meme plasmide que dans les autres pistes. Par contre attention il semble que tu n'aies pas vu la bande inférieure dans les pistes C, E,F,H,I
YOyo
