Bonjour,
J'ai un exercice où l'on me propose 3 enzymes de restriction EcoR1 et il est dit que la digestion est incomplète.
Comment calculer alors la taille des fragments obtenus ?
Est-ce que je considère que l'un des sites n'existe pas (le 3eme ????) ou cela veut-il dire que le plasmide va être coupé qu'en un seul site (et alors il y a linéarisation ?). Ou bien je suis totalement à coté de la plaque lol. Help
Merci
Bonjour,
La question est floue, vous ne voulez pas plutôt dire 3 sites de restriction à EcoR1 ?J'ai un exercice où l'on me propose 3 enzymes de restriction EcoR1 et il est dit que la digestion est incomplète.
Liniark
Oui, c’est ça. Excusez moi
ça veut dire qu'une partie des plasmides seulement sera coupée aux trois sites et donneront trois fragments (disons 1, 2 et 3). D'autres seront coupés que sur deux sites, à priori, donnant deux fragments de taille 1+2 et 3, ou 1 et 2+3, ou 2 et 3+1... Et si la digestion est vraiment vraiment incomplète, vous aurez des plasmides coupés une fois voire zero. Donc sur le profil, avec une digestion totale vous auriez 3 fragments, avec une digestion partielle, vous en auriez 3 (les petits), plus 3 (les combinaisons), plus un qui serait en réalité 3 formes différentes (les linéarisés a chacun des trois sites) et même le plasmide circulaire.
La vie trouve toujours un chemin
D'accord, merci beaucoup pour votre réponse. c'est beaucoup plus clair
