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Map de restriction




  1. #1
    BCN17

    Map de restriction

    Bonjour,

    J’ai un soucis avec la réalisation de map de restriction.
    Par exemple dans l’exercice ci-joint, je comprend comment placer XbaI et XhoI mais comment placer KpnI ?

    Déjà comme il s’agit d’un DNA linéaire, si on nous donne 2 fragments, cela signifie qu’on aura un seul site.

    Pour XbaI : on nous donne 2 fragments à 24 et 24,5. Donc on fait un trait à 24.

    Pour XhoI : on nous donne 2 fragments à 15 et 33,5 et on regarde la digestion de XbaI + XhoI et on voit qu’on a 3 fragments à 9, 15 et 24,5. On sait donc qu’on ne doit pas placer notre cible XhoI à droite de XbaI (car cette zone fait 24,5 kB) mais à gauche. Comme 9+15 = 24 on doit couper la zone de 24 en 2.
    Pour doit placer XhoI à 15 pour qu’il reste un espace de 9 kb entre XhoI et XbaI.

    Pour KpnI : On nous donne 3 fragments donc il y a aura 2 sites de coupes.
    Quand on regarde la ligne XbaI+ KnpI on nous donne 4 fragments, dont un de 24 kb. Donc on sait qu’on doit couper à droite de XbaI (dans la zone de 24,5 kb).
    Mais c’est la que je ne comprend pas comment faire..

    On nous a dit en cours de regarder aussi la partie digestions partielles, et d’additionner les fragments. Mais pourquoi ?

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    Images attachées Images attachées

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