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Problème tâche gel agarose

  1. Hayaokira

    Date d'inscription
    septembre 2017
    Messages
    4

    Problème tâche gel agarose

    Bonjour,

    Je suis actuellement en pleine optimisation de PCR et d'électrophorèse. Mais après ma dernière manip. un nouveau souci est apparu au moment de la révélation de mon gel : une grosse tâche. Il s'agit d'un gel d'agarose à 2%, j'utilise du TAE à 1%, avec un voltage à 135V pendant 45 min. On utilise du GelRed comme intercalant, que l'on utilise sous forme de bain, à l'obscurité pendant 15 min sans rinçage. Ensuite, la révélation se fait à l'aide du GelDoc de B....D.

    gel agarose.jpg

    A votre avis, d'où vient cette tâche et comment l'éviter ?

    Merci

    -----

     


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  2. Flyingbike

    Date d'inscription
    septembre 2009
    Localisation
    Viroflay
    Âge
    32
    Messages
    5 170

    Re : Problème tâche gel agarose

    gel pas homogène ? vitre sale ? elle es bien sur le gel et pas sur le support ou la vitre ?
    La vie trouve toujours un chemin
     

  3. Hayaokira

    Date d'inscription
    septembre 2017
    Messages
    4

    Re : Problème tâche gel agarose

    C'est dans/sur le gel car j'ai déplacé le gel sur la vitre et la tâche "se déplace" avec le gel. C'est comme si quelque chose avait diffusé dans le gel. J'ai préparé le bain de GelRed la veille et mon premier gel n'avait pas ce problème. Je ne comprends pas d'où ça peut venir.

    Est-ce que si quelqu'un a utilisé le même bain de GelRed que moi, pour un gel fait avec du TBE, ça peut donner ça ?
     

  4. Flyingbike

    Date d'inscription
    septembre 2009
    Localisation
    Viroflay
    Âge
    32
    Messages
    5 170

    Re : Problème tâche gel agarose

    je ne pense pas. le bain était récent ?

    De toute façon votre gel est largement assez clair pour que ça ne soit pas dramatique.

    Pourquoi ne pas utiliser le gelRed directement dans le gel ?
    La vie trouve toujours un chemin
     


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