remplacer le P32...

[invite43b11bce]

Bonjour,
Je cherche comment remplacer l'isotope P32 pour mes etudes sur la phosphorylation de proteines... En fait je voudrais eviter de manipuler la radioactivite.
Si vous avez des solutions pour moi, elles sont bienvenues !
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[Jean-Luc P]

- Utiliser un anticrorps qui ne reconnaît que la forme phosphorylée à un site donnée de la protéine. (pas fréquent mais très utile)

- spectrométrie de masse MALDI-tof

Pas d'autre idée.

[invite43b11bce]

Merci, mais dans mon cas je ne peux pas utiliser ces techniques...
D'autres idees ?

[invite9e6bc039]

Un petit shift en migration sur gel acrylamide, supprime par une activite phosphatase.
Mais ca te donne aucune information le residu phosphoryle (sauf s'il est unique, tu le mutes et hop)

J'ai bien peur que tu sois oblige de maniper un peu de p32...

Au passage les doses sont tres raisonnables et les protection efficaces (les rayons emis sont arretes par 3 cm de plastic)

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite43b11bce]

Je connais le P32, je l'ai deja utilise, mais pour cause d'allaitement je ne peux plus m'en servir...
Je vais voir ce que je peux faire en gel d'acrylamide, et meme en gel 2D, le shift sera + visible.
Merci pour les idees !