Bonjour a tous !

Je fais mes premiers pas sur ce forum... Dans l'espoir que vous pourrez m'aider.

Voila. Je cherche a tester la specificite de mes primers dans le cadre d'un test ARMS (Amplification Refractory Mutation System), afin de m'assurer que mon primer WT n'amplifie pas mon echantillon mute et vice-versa.

Malheureusement, je ne possede pas toujours d'homozygote mutant. J'ai essaye de contourner le probleme en utilisant des targets synthetiques soit pour le WT soit pour le mutant. Et c'est la que le bat blesse, j'obtiens une amplification dans tous mes essais, controle negatif (eau a la place de target) inclus ! Et ca me rend dingue !

Quelqu'un aurait il une idee quelconque pour expliquer ce phenomene, ou pourrait me suggerer une autre approche ?

Je vous remercie d'avance !