Electrophorese 2d

[invite50cb7a9c]

bonjour,
quelqu'un peut m'expliquer le pricipe de l'electrophorese en 2 dimensions???
merci
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[inviteb4850a9e]

Bonsoir

tu dépose ton "truc" à analyser sur 1 coin de ta membrane (gel) et tu fais migrer.
ton dépot sera alors plus ou moins bien étalé sur une ligne.
Ensuite, tu effectue une rotation de 90° de ta membrane (gel) et tu recommence la migration (avec une tension différente). Ainsi, tes "machins" qui n'auront pas été correctement séparés par la première migration, le seront par la 2è.

Je suis pas sur d'avoi expliqué correctement, mais ces souvenirs là sont assez loin.
Sans doute quelqu'un pourra te donner plus de détails, et des exemples, ce qui me manque...

[pimd]

tu fait migrer tes proteines sur une premieres dimensions, c'est à dire une séparation en fonction d'un premier paramètre discriminant (souvent le pI, pour cela tu utilise une bande avec un gradient de pH, les proteine stopent au pH correspondant à leur pI)
Tu fait ensuite migrer dans une autre dimension (gel d'agarose pour séparer en fonction de la MW) ainsi tu sépare des protéine qui ont par exemple une même taille mais un pI différent (différentes isoforme, variationd e modif secondaire...)