Enzyme et carte de restriction
Salut !
Je passe mes ECE dans 3 jours et ayant eu un pro de ***** cette année en SVT spécialité, je compte vraiment sur vous.
Malgrès la lecture des quelques topics sur la question, je ne comprend RIEN aux enzymes de restriction et surtout à la facon de dechiffrer une carte de restriction. Pourriez vous m'expliquer simplement et si possible me donner des exos corrigés pour que je puisse comprendre...
C'est assez préssé et je suis totalement dépassée !!!!!
Merci d'avance pour votre aide!
J'ai trouvé un exemple sur ce site mais je ne le comprend pas : http://spiral.univ-lyon1.fr/polycops...ieMoleculaire/
Pour Hind III : 10+7=17
Pour Eco RI : 8+6=14
Comment ca se fait que l'on trouve deux résultats differents ??
Et de plus quand je realise les coupure je n'aarive pas à retrouver celles de Hind III+Eco RI !!!
HELP !!!!!!
salut
attention sur ce site l'expl donné est une cartographie par southern, ca n'a rien a voir avec une carte de restriction!!!
La carte de restriction va te permettre de determiner la presence et le nombre de chacun des sites sur un plasmide. Ce n'est que de la logique il n'y a besoin d'aucun connaissance en biologie pour y arriver.
1site= 1 COUPURE = 1 fragment (l'adn est circulaire).
2sites= 2 fragments etc...
Il faut savoir que les fragments < a 100nt sont difficilement visible sur des gels d'agarose. donc il est possible qu'on ne les voit pas.
Ensuite tu melanges tes enzymes ca va te permettre de savoir comment placer les sites.
Par expl
Tu as ecoR1: 1000 +600nt +2000nt
bamHI: 300+3300
tu en deduis qu'il y a 3 sites ecoRI et 2 sites BamHI
ensuite la double digestion te donne:
EcoRI+BamHI= 600+2000+500+300+200
tout d'abord tu identifies les fragments provenants des simples digestions:
600 et 2000 proviennent que de ECORI (ils sont donc encadréspar des sites EcorI); 300 proviens que de BAMHI donc il est encadré par deux sites BamHI.
le fragment 1000 ecoRI a disparu et a ete remplacé par 500+200 (ce qui ne fait pas 1000, il manque 300!) or 300 c'est la taille du fragment BamHI. tu en deduis que ces 3 fragments sont sur un fragment encadrés par EcorI de 1000nt.
et voila c'est fini! au final ca te donne (il y a d'autre possibilité):
--->Eco---600---Eco---500---Bam---300---Bam--200--Eco---2000--->
(c'est circulaire).
Yoyo
Bonsoir a tous !! moi je les ai passer aujourdui je suis deprimer
je suis tombe sur els site de restriction mais il ya une question dans laquelle on me disait
choisiser l'enzyme la plus approprier pour etudier l'alleleh.adn
et moi jai choisit l'enzyma qui avait le plus de coupures 3 au maximume d'autre en avait pas ou une seul ou deux !
dite moi s'il vous plait ce que vous en penser par en regardant mon cour sa na rien avoir avec les resulatt que la prof nous a donnée
merci merci merci !!!!
...j'ai pas compris...
bonsoir,
l'enzyme à choisir est celle qui donne un nombre de fragments différent pour les deux allèles étudiés de façon à pouvoir les différencier avec une électrophorèse qui donnera donc des résultats différents.
Une terrasse de neuf étages commence par un tas de terre. Lao-Tseu
